摘要
NMGCF-19菌株是本实验室从临床上呈现腹泻与脑膜炎的羔羊中分离鉴定的大肠杆菌菌株。前期对该菌株的基因组序列测定与分析结果显示,ompA基因为潜在的毒力基因。为了确定ompA基因是否与NMGCF-19菌株的致病性有关及其机制,本研究应用CRISPR/Cas9技术构建了NMGCF-19ΔompA菌株,并应用小鼠模型确定了ompA基因在NMGCF-19菌株感染小鼠中的作用及其机制。结果显示,与野生型菌株比较,ompA基因敲除菌株感染小鼠的海马体神经元细胞坏死明显降低,且不呈局灶性。同时,脑组织中菌体检出量明显减少,紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的mRNA水平和蛋白表达水平均明显提高。上述结果表明ompA基因敲除后NMGCF-19菌株其致病性降低,该毒力基因ompA在NMGCF-19侵袭小鼠血脑屏障的过程中发挥重要作用。
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