hMSCs与同种异体骨共培养及其在促红素诱导下的成血管效应

作者：万岷; 金相廷; 张幸; 黄俊; 陈桂林; 夏红枝; 李东洋; 卢振刚; 刘希娥

来源：生物骨科材料与临床研究, 2018, 15(03): 6-82.

• 间充质干细胞
• 促红细胞生成素
• 同种异体骨
• 骨坏死
• 治疗

目的观察人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,h MSCs)与同种异体骨材料体外共培养的增殖情况及共培养条件下在促红细胞生成素(Erythropoientin,EPO)诱导下的成血管效应。方法实验在第三军医大学新桥医院骨科实验室进行。将h MSCs分两组放入96孔板中进行培养,每组8孔,其中实验组孔板中加入同种异体骨材料,分1、2、3、4天4个时间点应用CCK-8(Cell Counting Kit-8试剂)测量细胞增殖情况。将h MSCs分为A、B、C三组进行诱导。A组将h MSCs与骨材料放入离心管中培养,12 h后加入EPO进行诱导培养,B组不加入骨材料,余同A组,C组不加入EPO,余同A组。诱导培养60天后,0.25%胰酶消化细胞、制作细胞爬片,对PECAM-1、VEGF、VWF三种血管内皮标记物进行免疫荧光染色,每种标记物每组制作8张爬片染色,于荧光显微镜下观察拍照并通过图像处理软件检测染色细胞数量。结果与同种异体骨共培养后,各时间点实验组的h MSCs细胞增殖率与对照组无明显差异(P>0.05)。荧光显微镜下观察可见C组三种标记物均无明显表达,A组及B组血管内皮细胞标记物PECAM-1、VEGF、VWF荧光染色均有表达,两组PECAM-1、VEGF、VWF三种血管内皮标记物阳性细胞数均明显高于C组(P<0.01)。但A组与B组间无明显统计学差异(P>0.05)。结论 h MSCs可以在同种异体骨材料中正常存活、增殖,并在EPO诱导下向血管内皮细胞方向正常分化。