基于NLRP3炎症小体的抑瘤汤联合紫杉醇对上皮性卵巢癌的作用研究

作者：洪金妮; 林达涛; 陈仔颖; 陈捷

来源：药物评价研究, 2022, 45(12): 2515-2521.

• 抑瘤汤
• 上皮性卵巢癌
• NLRP3炎症小体
• 半胱氨酸蛋白酶-1
• 凋亡相关斑点样蛋白
• 白细胞介素-1β

目的 研究抑瘤汤对上皮性卵巢癌中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的作用。方法 通过免疫组化法比较人体的良性肿物和卵巢癌组织中NLRP3和白细胞介素(IL)-1β的表达水平；体外培养人上皮性卵巢癌细胞系A2780，分成对照组、化疗(给予DMSO溶解的紫杉醇100 nmol·L-1)组、化疗+抑瘤汤(1、10、100 mg·L-1)组，对照组加入等量DMSO，干预12、24、48、72 h后，CCK-8法检测细胞存活率，选取合适的抑瘤汤浓度及干预时间进行后续实验；Western blotting法检测NLRP3的蛋白表达；实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1 (Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和IL-1β的mRNA水平；ELISA法检测细胞上清液中NLRP3、Caspase-1、ASC和IL-1β蛋白水平。结果 与卵巢良性肿物组相比，卵巢癌患者的卵巢组织中NLRP3及IL-1 β蛋白表达显著上调(P<0.05)；干预24、48、72 h后，与对照组相比，化疗组的细胞存活率显著降低(P<0.05、0.001)；与化疗组相比，化疗+100 mg·L-1抑瘤汤组的细胞存活率显著降低(P<0.01、0.001)，选取100 mg·L-1抑瘤汤干预48 h进行后续研究。与对照组相比，化疗组的细胞中NLRP3蛋白表达水平降低，但无统计学意义；与对照组及化疗组相比，化疗+抑瘤汤组的细胞中NLRP3蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.001)。与对照组相比，化疗组和化疗+抑瘤汤组的NLRP3 mRNA和上清中蛋白水平显著降低(P<0.05、0.001)；与化疗组相比，化疗+抑瘤汤组的NLRP3 mRNA和上清中蛋白水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比，化疗组的Caspase-1、ASC、IL-1β的mRNA水平降低，但无统计学意义；化疗+抑瘤汤组的Caspase-1、ASC、IL-1 β mRNA水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比，化疗组和化疗+抑瘤汤组细胞上清中的Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白水平显著降低(P<0.01、0.001)；与化疗组相比，化疗+抑瘤汤组的Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白进一步降低，其中Caspase-1、ASC差异显著(P<0.05、0.001)。结论 NLRP3炎症小体在卵巢癌中高表达，抑瘤汤可抑制卵巢癌细胞NLRP3炎症小体的表达。

• 单位
  福建中医药大学; 广东省人民医院（广东省医学科学院）; 中山大学中山医学院