纳米磁球法分离检测甲胎蛋白变异体方法的建立及应用

作者：陈复华; 龚波; 胡晶莹; 俞菁; 梁俊; 梁晓飞; 胡荷宇

来源：肿瘤, 2015, 35(12): 1380-1386.

• 肝肿瘤
• 甲胎蛋白类
• 实验室技术与方法
• 植物凝集素类
• 金属纳米粒子

目的:建立一种简便、快速和高敏感度检测甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)变异体AFP-L3的新方法。方法:采用薄膜蒸发法制备扁豆凝集素(lens culinaris agglutinin,LCA)修饰的纳米功能磁球(LCA-纳米功能磁球),并通过磁性作用分离结合AFP-L3的LCA-纳米功能磁球,从而富集AFP-L3。结合人AFP定量检测试纸(时间分辨荧光法)检测AFP-L3的浓度,建立基于纳米功能磁球的AFP-L3检测方法。采用AFP-L3标准品比较LCA-纳米功能磁球法和已商品化的亲和离心层析柱法对AFP-L3的回收率,并应用上述2种方法分别检测了64例AFP阳性肝癌患者血清中AFP-L3的浓度并比较检测结果。选择830例血清样品,包括100例正常健康人群,300例慢性肝炎患者、228例肝硬化患者和202例肝癌患者,采用LCA-纳米功能磁球检测AFP-L3浓度,并比较各组的差异。结果:成功制备获得LCA偶联的纳米功能磁球,并建立了纳米磁球提取AFP-L3的方法。与亲和层析离心柱提取AFP-L3的方法进行比较,在AFP-L3浓度较高(4 000 ng/m L)时,LCA-纳米功能磁球法对AFP-L3的回收率显著优于亲和层析离心柱法(P<0.05),而在低浓度时两者的回收率相当。64例AFP阳性肝癌患者血清中AFP-L3的浓度检测结果显示,2种检测方法检测AFP-L3的阳性率均为37.5%,差异无统计学意义(P>0.05)。830例临床样本的检测结果显示,正常健康人群、慢性肝炎患者、肝硬化患者以及肝癌患者血清中AFP和AFP-L3的双阳性率分别为0.0%、3.3%、19.7%和60.9%,肝癌患者的阳性率明显高于良性肝病患者或正常人健康人群,和已报道结果一致。结论:采用LCA修饰的纳米功能磁球通过自动化提取AFP-L3的方法是一种准确、高效而简单的检测AFP-L3的方法。

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院; 上海市长宁区妇幼保健院; 癌基因与相关基因国家重点实验室