蛋白酶激活受体-2基因靶向shRNA表达质粒的构建及转染食管癌细胞致沉默效应的研究

作者：陈金梅; 邓全军; 谢立群; 赵建业; 刘彩虹; 郑艳敏

来源：实用医学杂志, 2013, (03): 349-351.

• 食管肿瘤
• EC109
• 小干扰RNA
• 蛋白酶激活受体2
• 基因沉默 Esophageal neoplasms
• EC109
• siRNA
• PAR-2
• Gene silencing

目的:构建靶向蛋白酶激活受体-2(PAR-2)基因的shRNA表达质粒,建立PAR-2基因沉默的食管癌EC109稳定细胞株。方法:针对人PAR-2的mRNA序列,设计并体外合成编码shRNA的两条特异性寡核苷酸序列,分别插入pGFP-V-RS质粒中构建2个shRNA表达质粒(PAR-2shRNA-1、PAR-2shRNA-2),经过鉴定,然后将表达质粒转染至食管癌细胞EC109中,经嘌呤霉素筛选,获得稳定干扰的细胞株,运用RT-PCR和WesternBlot检测PAR-2的表达。结果:PAR-2shRNA-1转染人食管癌细胞EC109后,PAR-2基因表达在mRNA和蛋白质水平都受到显著抑制,...

• 单位
  中国人民武装警察部队后勤学院