摘要
玉米棉子糖合成酶基因ZmRAFS受干旱诱导表达,但其响应干旱的表达调控机理仍不清楚。本研究通过RNA-seq数据分析及相关实验,发现转录因子ZmHB7在玉米幼苗中响应干旱和ABA处理。通过PCR方法克隆了ZmHB7编码区片段,并构建了其原核表达载体和植物表达载体。体外诱导ZmHB7蛋白表达,纯化回收并制备相应抗体。Western blot实验证实了ZmHB7蛋白在玉米叶肉原生质体中正确表达。将ZmHB7和GFP植物表达载体分别与Zm RAFS基因全长启动子片段驱动的双荧光素酶报告载体转入玉米原生质体中,酶活检测结果显示,ZmHB7转录因子能够激活ZmRAFS启动子驱动的海参荧光素酶基因(Rluc)的表达。逐步截短Zm RAFS基因启动子,将Zm RAFS不同长度启动子片段驱动的双荧光素酶报告载体分别与GFP或ZmHB7植物表达载体转入玉米原生质体中,酶活检测结果发现,ZmHB7仍能上调ZmRAFS基因,这一结果说明ZmHB7可能间接调控ZmRAFS基因的表达。本文初步探索了ZmRAFS基因响应干旱的分子调控机制,为进一步深入研究棉子糖合成酶基因Zm RAFS的表达调控奠定了基础。
-
单位生命科学学院; 西北农林科技大学