络石内生菌露湿漆斑菌发酵液的细胞毒活性成分研究

作者：陈曦; 张小君; 叶桐; 张雨欣; 申丽^*

来源：实用临床医药杂志, 2019, 23(10): 47-52.

• 植物内生菌
• 次生代谢产物
• 单端孢霉烯
• 细胞毒活性
• 细胞周期

目的研究络石内生菌露湿漆斑菌(Myrothecium roridum)发酵液的细胞毒活性成分,以期获得结构新颖、活性显著的化合物,为发现抗肿瘤先导化合物提供实验依据。方法以氢谱(1H-NMR谱)和薄层色谱(TLC)示踪,采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和高效液相色谱法(HPLC)进行发酵液浸膏的分离纯化;利用高分辨质谱、核磁共振谱及文献比对方法鉴定化合物的结构;采用MTT法测定化合物对Hep G2细胞和Hela细胞的体外细胞毒活性,顺铂为阳性对照药;采用流式细胞术分析化合物对肿瘤细胞的细胞周期影响;采用Western blot法检测化合物处理后肿瘤细胞中细胞周期负调控蛋白p27的表达水平。结果从M. roridum发酵液中分离获得2个单端孢霉烯化合物12’-hydroxyroridin E (1)和trichoverritone(2),其对HepG2细胞和Hela细胞有明显的增殖抑制作用,IC50值分别为0. 78和1. 86μg/m L、0. 05和0. 13μg/m L,阳性对照药顺铂的IC50值分别为4. 9和2. 28μg/m L。进一步研究发现,12’-hydroxyroridin E (1)能诱导HepG2细胞G2期周期阻滞,且上调细胞中p27蛋白的表达。结论 12’-hydroxyroridin E (1)可能通过诱导HepG2细胞G2期周期阻滞而抑制其增殖抑制,该诱导作用可能与细胞中p27蛋白的表达上调相关。

• 单位
  转化医学研究院; 扬州大学