结冷胶裂解酶在毕赤酵母中的异源表达及其性质和应用

作者：段飞扬; 王力; 詹晓北; 蒋芸; 李志涛; 高敏杰^*

来源：食品与发酵工业, 2022, 48(09): 1-7.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.029681

• 结冷胶裂解酶
• 毕赤酵母
• 异源表达
• 酶学性质
• 结冷胶寡糖

结冷胶寡糖由结冷胶降解所得，具有益生活性、植物诱导抗病性等多种生物学功能，其制备意义重大。该研究通过构建重组毕赤酵母以实现结冷胶裂解酶异源表达，并应用于裂解结冷胶制备结冷胶寡糖。重组菌株经筛选鉴定，首先于摇瓶水平诱导表达结冷胶裂解酶，获得酶活力最高为266.4 U/L的菌株；随后在7 L发酵罐中进行高密度发酵，酶活力达954.6 U/L。对重组结冷胶裂解酶进行分离纯化并研究其酶学性质，结果表明，酶促降解反应最适催化温度和pH分别为45℃和7.5,在45～50℃和pH 7.0～9.0下稳定，Zn2+对酶活性略有促进作用，Al3+对酶促反应具有较强的抑制作用。通过薄层色谱法联用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析降解产物，该结冷胶寡糖聚合度为4。该研究首次在毕赤酵母中成功表达Bacillus sp.GL1来源结冷胶裂解酶，特异性降解结冷胶制备寡糖，具有一定的工业应用潜力和指导意义。

• 单位
  生物工程学院; 江南大学