摘要

目的探讨淫羊藿素对人肺腺癌细胞(A549细胞)诱导破骨细胞前体细胞(RAW264.7细胞)向破骨细胞(OC)分化的影响及机制。方法常规培养RAW264.7细胞、A549细胞,加入不同浓度淫羊藿素干预后,用MTT法筛选淫羊藿素5、10μmol/L两个浓度进行实验。RAW264.7细胞、A549细胞共培养7 d,将RAW264.7细胞随机分为对照组、淫羊藿素低剂量组、淫羊藿素高剂量组,分别加入0.01%DMSO、5μmol/L淫羊藿素、10μmol/L淫羊藿素干预48 h,以不加A549细胞的RAW264.7细胞作为阳性对照组。用抗酒石酸磷酸酶法观察各组OC的数量,流式细胞术测算OC凋亡率,实时荧光定量PCR法检测OC中AMPK、mTOR、CTSK mRNA表达,Western blotting法检测OC中AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果与对照组比较,5μmol/L淫羊藿素组、10μmol/L淫羊藿素组OC数量少(P均<0.05);与5μmol/L淫羊藿素组比较,10μmol/L淫羊藿素组OC数量少(P<0.05)。与对照组比较,5μmol/L淫羊藿素组、10μmol/L淫羊藿素组OC凋亡率高(P均<0.05);5μmol/L淫羊藿素组与10μmol/L淫羊藿素组OC凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,5μmol/L淫羊藿素组、10μmol/L淫羊藿素组OC中CTSK mRNA相对表达量低、AMPK mRNA相对表达量高、mTOR mRNA相对表达量低(P均<0.05);与5μmol/L淫羊藿素组比较,10μmol/L淫羊藿素组OC中CTSK mRNA表达低、AMPK mRNA相对表达量高、mTOR mRNA相对表达量低(P均<0.05)。与对照组比较,5μmol/L淫羊藿素组、10μmol/L淫羊藿素组OC中AMPK、p-AMPK蛋白相对表达量高,mTOR、p-mTOR蛋白相对表达量低(P均<0.05);与5μmol/L淫羊藿素组比较,10μmol/L淫羊藿素组OC AMPK、p-AMPK蛋白相对表达量高,mTOR、p-mTOR蛋白相对表达量低(P均<0.05)。结论淫羊藿素可抑制A549细胞诱导RAW264.7向OC分化,其作用机制可能与AMPK/mTOR信号通路有关。