鸭IFN-γ,IL-2 mRNA荧光定量RT-PCR方法的建立及应用

作者：张盼涛; 曾显营; 杨婧; 李倩倩; 田国彬; 陈化兰

来源：中国预防兽医学报, 2013, (06): 472-476.

• 荧光定量PCR
• SYBR GreenⅠ
• 细胞因子
• SEA
• 禽流感灭活疫苗 real-time PCR
• cytokines
• AIV inactivated vaccine

为评价疫苗免疫对鸭细胞免疫应答反应的影响,本研究提取鸭脾脏组织总RN A,采用鸭IFN-γ、IL-2、GAPDH基因特异性引物,建立了SYBR Green I荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法。结果显示IFN-γ、IL-2、GAPD H基因扩增标准曲线相关系数均高于0.99;3者扩增效率相近,均接近于100%;融解曲线呈特异性单峰;各基因组内和组间变异系数均小于2%。应用该方法检测不同佐剂禽流感灭活疫苗免疫樱桃谷鸭后脾脏组织IFN-γ和IL-2 mRNA的相对表达水平。结合免疫后抗体水平及攻毒保护结果,比较不同佐剂对禽流感灭活疫苗免疫应答的影响。结果显示,金黄色葡萄球菌毒素A重组蛋白(...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 农业部; 兽医生物技术国家重点实验室