一种高效扩增人T细胞受体α链可变区基因方法的建立

作者：王琳; 叶海燕; 李晓东; 刘妍; 范振平; 张玲霞; 徐东平

来源：解放军医学杂志, 2009, (02): 139-142.

• T淋巴细胞
• 受体
• 抗原
• T细胞
• 克隆
• 分子 T-lymphocytes
• receptors
• antigen
• T-cell
• cloning
• molecular

目的建立一种高效扩增人T细胞受体(TCR)α链可变区(Vα)基因的方法。方法根据TCR Vα32个亚家族的基因序列特点,设计扩增Vα基因的上游内、外引物各42条,并将上游内、外引物各分为5组简并引物。在恒定区(C区)设计下游内、外引物,测序引物以及扩增Cα基因的上游引物各1条。提取细胞RNA,用PolyA介导反转录后,采用巢式PCR扩增正常人外周血单个核细胞(PBMC)中CD8 T细胞TCR Vα的32个亚家族基因,以Jurkat T淋巴瘤细胞作为对照。用T-easy载体克隆RT-PCR产物,对克隆基因进行测序分析。结果从正常人CD8 T细胞中扩增到了所有TCR Vα亚家族基因,以10个Jur...

• 单位
  解放军第302医院