大肠杆菌O157:H7异硫氰酸荧光素标记抗体的制备及评价

作者：方珍; 鞠文; 秦亚楠; 孟日增; 潘风光

来源：吉林大学学报(医学版), 2013, (01): 165-169+198.

• 大肠杆菌O157∶H7
• 多克隆抗体
• 荧光免疫
• 异硫氰酸荧光素 Escherichia coli O157∶H7
• polyclonal antibody
• immunofluorescence
• fluorecein isothiocyante

目的:制备高效价、高纯度、特异性好、荧光强度高及稳定的抗大肠杆菌O157∶H7异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗体,初步探讨其在大肠杆菌荧光免疫检测试验中的应用。方法:复苏培养E.coli O157∶H7标准菌株,甲醛灭活制备疫苗免疫家兔。4次免疫后,颈动脉采血分离血清,经辛酸-饱和硫酸铵法粗提后应用蛋白亲和层析柱HiTrap Protein G HP进行IgG纯化,借助SDS-PAGE电泳、BCA试剂盒法、间接ELISA法分别对蛋白纯度、蛋白含量及抗体效价进行测定。应用不同FITC与蛋白量比值以及不同标记反应条件对多克隆抗体进行标记。比较荧光抗体F485/535,结合差异性显著分析对FITC与...

• 单位
  吉林大学; 吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心