摘要
目的 建立液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法测定粪便短链脂肪酸(SCFAs),并检测经纳豆红曲干预后小鼠粪便中SCFAs的水平。方法 利用2-硝基苯肼盐酸盐(2-NPH·HCl)对粪便样本进行衍生,上清液萃取吹干后初始流动相复溶上机。将41只7周龄~8周龄ApoE-/-雄性小鼠随机分成4组:低脂饲料组(LFD)、高脂高胆固醇饲料组(HFD)、低脂饲料+0.3 g/kg纳豆红曲组(LFD+NR)和高脂高胆固醇饲料+0.3 g/kg纳豆红曲组(HFD+NR)。干预12周后检测粪便SCFAs水平和空腹血糖水平。结果 目标待测物在LC-MS/MS下分离良好。所有待测物线性相关系数在0.997以上,回收率均在80.95%~119.45%,精密度均在0.2%~5.4%,满足方法学要求。联合补充纳豆红曲12周增加LFD饲养的ApoE-/-小鼠粪便丙酸和异丁酸水平。粪便中乙酸与空腹血糖水平成负相关,辛酸与空腹血糖水平成正相关。结论 通过LC-MS/MS测定粪便SCFAs水平的方法准确度、灵敏度高,定量准确。粪便SCFAs含量与空腹血糖水平具有相关性,提示纳豆红曲可能通过影响粪便SCFAs含量影响血糖水平,需进一步探索机制。
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单位公共卫生学院; 深圳市计量质量检测研究院; 中山大学; 包头医学院