摘要

目的观察微重力生物反应器内拟胚体(EBs)来源细胞的肝细胞分化与成熟。方法将未分化鼠胚胎干细胞(ES细胞)以1×106/mL移入微重力反应器内,在DMSO、地塞米松、FGF4、HGF等刺激作用下,进行15 d的旋转培养。采用ELISA法动态检测培养液中鼠白蛋白的产生量。培养结束时转移EBs于载玻片和培养板,分别检测EBs来源细胞的糖原储存和对靛青绿(ICG)、荧光素标记低密度脂蛋白(D iI-Ac-LDL)的摄取能力。结果在生物反应器旋转培养的第5、10 d,未从培养液中检出特异的鼠白蛋白,而在第15 d的培养液中检出一定量的鼠白蛋白。与原代培养的成熟肝细胞一样,转种的EBs来源细胞period ic ac id-Sch iff(PAS)糖原染色阳性,ICG摄取试验阳性,D iI-Ac-LDL摄取试验阳性。未分化的ES细胞均呈阴性。结论微重力生物反应器不仅能加快EBs的形成与肝细胞分化,而且能促进分化肝细胞的成熟。