摘要
为开发山桐子(Idesia polycarpa Maxim.)简单序列重复(simple sequence repeat, SSR)分子标记,我们构建了山桐子特异性位点扩增片段测序(specific-locus amplified fragment sequencing, SLAF-seq)数据库。基于多态性SLAF标签序列,利用MISA程序识别到SSR位点30 121个,SSR的发生频率为6.16%。SSR序列中包括3 451种基元重复类型,其中单核苷酸、二核苷酸和三核苷酸为优势重复基元,SSR位点数分别为22 191 (73.67%)、3 184 (10.57%)和1 338 (4.44%)。单核苷酸中A/T类型比例最高,为22 117 (73.42%);二核苷酸和三核苷酸中以TA/AT (1 743:5.79%)和AA~(A, G, C, T四种碱基均可) (233; 0.77%)重复比例最高,78.52%的SSR长度主要在10~15 bp之间。为验证SSR的可靠性,随机设计合成100对SSR引物,经PCR分析,其中96对引物能扩增出预期条带,35对引物能扩增出多态性条带。选择6对多态性引物对30份山桐子样品进行遗传分析,聚类结果很好地反映出样品来源、地理分布和资源特征。以上结果表明本研究开发的SSR标记成本低、多态性高,未来可用于山桐子种质资源分析、遗传图谱构建和分子辅助育种等研究。
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单位长江大学; 湖北省农业科学院果树茶叶研究所