大豆GmEIF4B1基因的克隆及表达分析

作者:李沫; 李思楠; 梅宏瑶; 金恩成; 陈庆山*; 苏安玉*; 武小霞*
来源:分子植物育种, 2019, 17(16): 5199-5208.
DOI:10.13271/j.mpb.017.005199

摘要

为了解GmEIF4B1基因的功能及在大豆种子萌发期间GmEIF4B1基因表达的作用。本研究前期在外源激素6-BA调控下以大豆下胚轴的转录组进行测序,筛选出差异表达的基因GmEIF4B1。根据GmEIF4B1基因登录号,从大豆中克隆出GmEIF4B1基因的全长CDS序列。对GmEIF4B1的启动子序列、氨基酸序列、编码的蛋白质结构、亲疏水性以及同源进化树进行分析。结果表明:GmEIF4B1编码区cDNA长度为1 656 bp,编码551个氨基酸,GmEIF4B1编码的蛋白为亲水性蛋白;分析其蛋白功能结构域发现,GmEIF4B1蛋白具有一个植物特异性真核起始因子4B,为eIF-4B超家族成员;构建系统进化树发现其与蒺藜苜蓿和拟南芥亲缘较近。构建原核表达载体,通过IPTG诱导表明GmEIF4B1基因表达蛋白与预测蛋白大小相符。同时对GmEIF4B1基因进行表达模式分析,结果表明:GmEIF4B1基因的表达量会受6-BA及时间影响。以上结论可以为进一步判断GmEIF4B1基因是否在大豆再生过程中起的关键作用提供参考。

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