甲型流感病毒M2基因真核表达载体的构建及序列分析

作者：杨靖; 张卫东; 李明远; 曹康; 蒋忠华; 李虹

来源：中国人兽共患病学报, 2006, (02): 157-159+117.

DOI：10.3969/j.issn.1002-2694.2006.02.015

• 甲型流感病毒
• M2基因
• 真核表达载体

目的构建含有甲型流感病毒M2基因的真核表达载体并分析插入的M2基因序列。方法从接种人流感病毒株A/PR/8/34(H1N1)的鸡胚尿囊液中提取病毒RNA,用特异引物进行RT-PCR,扩增M2基因。通过分子克隆技术将所扩增片段克隆入真核表达质粒载体pcDNA3.1(+)。经双酶切、PCR鉴定后挑选阳性克隆测序鉴定并对插入的M2基因序列进行分析。结果经双酶切、PCR及测序鉴定证实M2基因的真核表达载体构建成功。序列分析有4个氨基酸出现变异,提交Genbank进行Blast比对显示同源性97%(Genbank/NCBI AY768951)。结论M2四聚体蛋白具有H+通道功能,能够协助病毒与宿主细胞膜融合后释放RNP复合体,还能稳定HA蛋白的结构。M2蛋白的高度保守性和具有交叉保护能力特性使之成为新型的通用流感疫苗的突破口。该结果将为甲型流感病毒基因工程疫苗,通用疫苗和核酸疫苗的研究打下基础。

• 单位
  河北医科大学; 基础医学院; 四川大学; 郧阳医学院; 成都医学院