2种灵芝原生质体制备及再生条件优化

作者：许琳; 刘洋; 张雪超; 胡清秀; 闫梅霞

来源：吉林农业大学学报, 2022, 1-10.

DOI：10.13327/j.jjlau.2021.1920

• 灵芝
• 原生质体
• 正交试验
• 再生

·以赤芝及无柄灵芝菌株为实验材料，通过单因素及正交试验，对比分析菌龄、酶解时间、酶解温度、离心转速对灵芝原生质体制备的影响，优化制备条件，并初步探讨不同稳渗剂类型、浓度及培养方法对灵芝原生质体再生的影响。结果表明：赤芝原生质体制备最佳条件为菌龄10d，酶解温度35℃，酶解3h，4000r/min离心，原生质体产量为9.75×107个/ml；无柄灵芝原生质体制备为菌龄7d，酶解温度31℃，酶解3.5h，3000r/min离心，原生质体产量为7.48×107个/ml。灵芝菌株以0.5mol/l甘露醇做稳渗剂，双层平板培养法（上层培养基琼脂浓度为1.1%）进行再生可以获得高再生率。

• 单位
  中国农业科学院农业资源与农业区划研究所; 中国农业科学院特产研究所