摘要
为了对杨凌地区某鸡场鸡群球虫病疑似病例进行确诊,采用卵囊分离及纯化、形态学方法、分子生物学方法及动物感染试验对病原进行分离鉴定。结果表明,采用饱和盐水溶液漂浮法对样品中的鸡球虫卵囊分离后,镜检发现大小约为22μm×19μm的未孢子化的球虫卵囊;将获得的球虫卵囊置于25 mg/mL重铬酸钾溶液中于28℃孵育48 h进行孢子化,镜检发现孢子化的卵囊具有分化明显的4个孢子囊,每个孢子囊含2个子孢子;PCR鉴定发现只有鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)分别出现了约300 bp和450 bp的目的条带,扩增产物序列与GenBank中相应的序列一致;动物感染试验发现孢子化的卵囊感染鸡只6 d后出现腹泻和血便症状,从腹泻和血便的鸡只粪便中再次分离到鸡球虫卵囊。
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