沉默STC2对人结肠癌SW480细胞肝转移裸鼠模型的影响及作用机制研究

作者：李乾元; 周秀扣; 方征宇; 潘志芸

来源：国际消化病杂志, 2021, 41(05): 353-359.

• 斯钙素2
• Wnt/β-catenin信号通路
• 结肠癌
• 肝转移

目的基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路探讨沉默斯钙素2(STC2)对人结肠癌SW480细胞肝转移裸鼠模型的影响及作用机制。方法将30只SPF级雄性BALB/c裸鼠随机分为3组,即pLL3.7-shSTC2组(沉默STC2,以pLL3.7-shSTC2转染SW480细胞构建),pLL3.7-NC组(阴性对照,以阴性病毒载体转染SW480细胞构建)和pLL3.7-Con组(空白对照,仅以转染试剂处理的SW480细胞),每组各10只。建模3周后处死裸鼠,观察各组裸鼠肝脏标本的转移瘤情况,肝组织行H-E染色后在显微镜下观察各组的病理改变。采用RT-PCR、免疫组织化学法及蛋白质印迹法(Western blotting)检测STC2、上皮间质转化(EMT)及Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达。结果与pLL3.7-NC组、pLL3.7-Con组相比,pLL3.7-shSTC2组的STC2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与pLL3.7-shSTC2组相比,pLL3.7-NC组和pLL3.7-Con组裸鼠的肝脏外形不规则程度、质地脆硬度及转移瘤的直径、数量、瘤体破溃等情况更为严重。Western blotting法检测结果显示,与pLL3.7-Con组、pLL3.7-NC组相比,pLL3.7-shSTC2组肝转移瘤组织中STC2、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、β-catenin、T细胞因子4(TCF-4)、C-myc及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的蛋白表达水平均明显降低(P均<0.05),E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平明显升高(P<0.05)。RT-PCR法检测结果显示,与pLL3.7-Con组、pLL3.7-NC组相比,pLL3.7-shSTC2组肝转移瘤组织中TCF-4、C-myc及Cyclin D1的mRNA表达水平均明显降低(P均<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,与pLL3.7-Con组、pLL3.7-NC组相比,pLL3.7-shSTC2组肝转移瘤组织中β-catenin表达水平明显降低。结论沉默STC2可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路来减少结肠癌细胞的增殖、侵袭,从而抑制肿瘤肝转移。

• 单位
  浙江省中医院