用于活体影像技术稳定表达荧光素酶的肺癌细胞系的建立

作者：郑国兵; 刘启才; 李晓艳; 周问渠; 彭燕; 李冰

来源：现代生物医学进展, 2010, (09): 1658-1660.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2010.09.050

• 细胞克隆
• 荧光素酶
• 肺癌细胞spc-a-1
• G418 Cell clone
• Luciferase
• lung cancer cell spc-a-1
• G418

目的:建立稳定表达萤火虫荧光素酶的人肺癌细胞系并进行体外验证。方法:亚克隆萤火虫荧光素酶基因到真核表达载体pRc/CMV2上,构建重组质粒pRc/CMV2-luc ,转染到肺癌细胞株spc-a-1,经过G418筛选获得单细胞抗性克隆。抗性克隆连续传代,并通过荧光素酶活性检测筛选出高水平表达荧光素酶的稳定细胞克隆,在体外检测细胞的生物发光能力与细胞数量的相关性。结果:构建的pRc/CMV2-luc 真核表达质粒转染spc-a-1细胞后,经G418筛选出多个抗性克隆;传代至40代时确定有3株细胞的荧光素酶活性最高;活体影像系统体外检测证实阳性细胞株发光强度与数量呈正相关。结论:结果表明成功构建了稳...

• 单位
  广州医科大学; 中山大学附属第一医院