慢病毒介导的人黏蛋白1基因修饰的树突状细胞体外抗结肠癌免疫效应

作者：王斌; 朱毅; 张静静; 徐泽宽

来源：中华实验外科杂志, 2012, 29(2): 206-208.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2012.02.014

• 黏蛋白1
• 慢病毒
• 树突状细胞
• 结肠癌

目的 观察慢病毒介导的人黏蛋白1(MUCl)核心肽串联重复(TR)基因修饰树突状细胞(DC)后体外诱导的特异性抗结肠癌免疫效应.方法 CD14+外周血单核细胞诱导DC,感染含人MUC1TR基因的慢病毒表达载体pLV-MUC1,感染后DC按DC/T=1∶10与自体T淋巴细胞共培养21 d诱导产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL),CTL与肿瘤靶细胞以5∶1、10∶1、20∶1的效靶比共孵育,乳酸脱氢酶(LDH)释放法和Elispot法分别检测CTL体外杀伤活性及干扰素(IFN)-γ的释放,以空载pLV-GFP感染DC组和未感染DC组作为对照进行比较.结果 pLV-MUC1感染DC后荧光显微镜下可见绿色荧光表达,流式检测感染效率约为32％；诱导产生的CTL对MUC1和HLA-A2双阳性的HCT-116肿瘤细胞的杀伤活性[E/T =5∶1时为(12.74±1.91)％,10∶1时为(23.14±2.97)％,20∶1时为(35.38±3.15)％]显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01)；感染后DC诱导的CTL分泌IFN-γ的能力明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 慢病毒介导的MUC1核心肽TR基因修饰的DC可有效诱导体外特异性抗结肠癌免疫效应.

• 单位
  南京医科大学第一附属医院