摘要
目的观察三七总皂苷(PNS)联合骨髓间充质干细胞(BMSC)移植治疗大鼠心肌梗死的效果及其可能机制。方法取4周龄雄性SD大鼠骨髓分离培养BMSC,流式细胞仪测定细胞表型,PKH26标记BMSC;经冠状动脉结扎制备心肌梗死大鼠模型,将40只大鼠分成假手术组、心肌梗死组、BMSC组和BMSC+PNS[500 mg/(kg·d)]组,每组10只。术后14 d,心脏超声检测大鼠心脏功能,取心脏组织,苏木素-伊红(HE)染色观察病理学改变,马松染色观察胶原含量。免疫组织化学(组化)检测心脏组织中CD31表达;蛋白免疫印迹法检测血管内皮生长因子A(VEGF-A)的表达水平;ELISA法检测VEGF含量。结果流式细胞仪测定细胞表型发现BMSC表面高表达CD90和CD44,低表达CD34和CD45。与BMSC组相比,BMSC+PNS组心脏组织中BMSC存活率明显增加(P <0.05)。HE染色和马松染色结果显示,BMSC组和BMSC+PNS组较心肌梗死组心脏组织内细胞坏死程度和胶原纤维沉积明显减少,且BMSC+PNS组效果更加明显。心脏超声结果发现,BMSC组和BMSC+PNS组较心肌梗死组心功能明显改善,LVEF和左室缩短分数增加,而收缩期左室内径和舒张期左室内径降低(P均<0.05)。免疫组化和蛋白免疫印迹法结果显示,与BMSC组相比,BMSC+PNS组可增加心脏组织内CD31和VEGF-A蛋白的表达(P均<0.05),同时增加心脏组织匀浆中的VEGF含量(P <0.05)。结论 PNS联合BMSC移植治疗可有效促进BMSC存活率和VEGF分泌,促进心肌梗死后心脏组织修复,改善心功能。
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单位北京大学首钢医院