摘要
背景:胶原因具有良好的生物相容性和降解性能,常用于促进伤口愈合,但由于其不具备抗菌性能,不能预防伤口感染。目的:通过冷冻干燥法制备壳聚糖胶原海绵,使其兼具良好的抗菌及止血效果。方法:壳聚糖溶液与碳酸氢钠溶液在37℃下成凝胶态,利用冷冻干燥法制备壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原海绵作为实验组,以壳聚糖海绵及壳聚糖/碳酸氢钠海绵为对照组,扫描电镜观测海绵的微观形貌,测定其pH值、孔隙率、吸水倍数、降解率及对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌率;利用CCK-8法和Live/Dead染色检测海绵浸提液的细胞毒性;使用大鼠截尾出血模型检测海绵的止血效果;建立大鼠皮肤创伤模型,通过苏木精-伊红染色及Masson染色观察海绵植入7 d后的组织愈合情况。结果与结论:(1)相较于其他两种海绵,壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原海绵的绵孔隙更大,外壁更粗糙,吸水性更强、孔隙率及吸水倍数更大;而且壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原海绵孔隙率均大于另外两种海绵(P <0.01);平均吸水倍数复合海绵大于壳聚糖海绵(P <0.000 1)和壳聚糖/碳酸氢钠海绵(P <0.05);(2)抗大肠杆菌率检测结果显示:壳聚糖海绵>壳聚糖/碳酸氢钠海绵(P <0.001)>壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵(P <0.000 1);(3)抗金黄色葡萄球菌率检测结果显示:壳聚糖海绵>壳聚糖/碳酸氢钠海绵>壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵(P <0.01);(4)壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵无细胞毒性且可促小鼠成纤维细胞(L929)增殖,促细胞增殖效果优于空白组(P <0.05)、壳聚糖组(P <0.000 1)与壳聚糖/碳酸氢钠组(P <0.05);(5)壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵止血效果良好,优于其他三组;(6)壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵植入大鼠背部创口1周,周围皮肤无明显炎症反应,新生毛细血管及胶原含量明显高于其他两种海绵,皮肤组织恢复最佳;(7)上述数据证实,壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵生物相容性良好,具有良好的抗菌止血及促进组织愈合效果。
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