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摘要
本发明公开了一种Slco1b2基因敲除大鼠的构建方法,利用CRISPR/Cas9系统进行Slco1b2基因敲除大鼠的构建,包括Slco1b2敲除靶点的选择、sgRNA与Cas9mRNA的体外合成与转录、假孕母鼠的准备、单细胞胚胎的体外显微注射与移植、大鼠繁殖与筛选及得到纯合子Slco1b2基因敲除大鼠。经过T7EI核酸内切酶验证,通过本发明方法制备得到的基因敲除大鼠没有脱靶现象的产生,且在4周左右的F2代敲除大鼠中,总胆红素、直接胆红素和间接胆红素含量均显著性高于野生型大鼠。本发明还提出了将所述构建方法用于高胆红素血症疾病研究及药物研发中的应用。本发明为研究治疗胆红素升高等疾病研究提供了有效方法,为药物研发提供了有效实验工具,具有广泛应用前景。
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