肝癌患者血浆端粒酶逆转录酶基因实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：杨英俊; 陈辉

来源：中国生物制品学杂志, 2010, (12): 1380-1383.

DOI：10.13200/j.cjb.2010.12.107.yangyj.025

• 实时荧光定量PCR
• 人类端粒酶逆转录酶基因
• 肝肿瘤 Real-time fluorescent quantitative PCR
• Human telomerase reverse transcriptase(hTERT)gene
• Liver tumor

目的建立实时荧光定量PCR法检测肝癌患者血浆端粒酶逆转录酶(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因水平。方法提取人全血基因组DNA,常规PCR扩增hTERT基因,与pMD18-T载体连接,转化入大肠杆菌DH5α,提取重组质粒pMD18-T-hTERT作为定量检测的标准品,绘制实时荧光定量PCR标准曲线,并进行方法的验证。采用建立的实时荧光定量PCR法检测肝癌患者和健康人血浆中hTERT DNA的水平。结果重组质粒pMD18-T-hTERT经PCR及测序鉴定证明构建正确。以该重组质粒为标准品绘制的标准曲线在103～108copies/μl浓...

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院