摘要
目的 基于线粒体自噬途径探讨丹黄散促进糖尿病足溃疡db/db小鼠创面愈合作用及可能机制。方法 将18只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、生长因子组、丹黄散组各6只,另选择6只正常小鼠作为正常组,各组均制备溃疡创面。清创后,模型组和正常组创面涂上麻油,生长因子组创面涂上生长因子凝胶,丹黄散组用丹黄散覆盖创面,均每日换药1次。观察各组创面愈合情况,计算各组干预第7天、第14天、第21天创面愈合率,HE染色观察第14天创面组织病理形态;透射电镜观察干预第7天创面组织线粒体自噬情况,Western blot法检测干预第7天创面组织中PINK1、Parkin蛋白表达情况,采用博乐bio plex Pro悬浮芯片检测血清血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平。结果 生长因子组、丹黄散组干预第7天、第14天、第21天创面愈合率均明显高于同期模型组(P均<0.05),且丹黄散组干预第14天、第21天创面愈合率均明显高于同期生长因子组(P均<0.05)。透射电镜观察发现,生长因子组和丹黄散组线粒体不规则、受损或水肿情况较轻,可见自噬体吞噬受损线粒体,溶酶体与受损线粒体融合。模型组小鼠创面组织中PINK1、Parkin蛋白相对表达量和血清VEGF、EGF、bFGF水平均明显低于正常组(P均<0.05);生长因子组、丹黄散组创面组织中PINK1、Parkin蛋白相对表达量和血清VEGF、EGF、bFGF水平均明显高于模型组(P均<0.05),且丹黄散组血清VEGF、EGF、bFGF水平均明显高于生长因子组(P均<0.05)。结论 丹黄散可促进糖尿病足溃疡db/db小鼠创面愈合,其作用途径可能与调控线粒体自噬及调节细胞因子VEGF、EGF、bFGF表达相关。
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单位贵州中医药大学; 雅安市人民医院