呼吸道合胞病毒重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法及免疫原性研究

作者：曾瑞红; 龚伟; 梅兴国; 刁志花; 郝丽梅

来源：中国药学杂志, 2007, (02): 90-93.

• 呼吸道合胞病毒
• 重组蛋白DsbA-G1F/M2
• 原核表达
• 纯化
• 免疫原性 respiratory syncytial virus
• recombinant protein DsbA-G1F/M2
• prokaryotic expression
• purification
• immunogenicity

目的建立呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法,并研究其免疫原性。方法PCR扩增G1和F/M2基因片段,经酶切后插入原核表达载体pET-DsbA中,构建重组质粒pET-DsbA-G1F/M2,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni+螯合亲和色谱法纯化尿素变性的包涵体溶液,梯度透析复性,Western-blot鉴定重组蛋白的RSV特异性,免疫BALB/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT法测定细胞毒性T细胞活性(CTL)。结果构建的重组质粒在E.coli中表达了RSV特异性的重组蛋白,经变性、纯化并复性后获得了高...

• 单位
  军事医学科学院毒物药物研究所