摘要
目的探讨过表达NDUFA4对人结直肠癌细胞体外生长的影响及其机制。方法将p-NDUFA4重组质粒(p-NDUFA4组)和p-Cont对照质粒(p-Cont组)体外分别转染人结直肠癌HCT116细胞;采用Real-timePCR和Westernblot检测细胞中NDUFA的表达;CCK-8法和克隆形成实验分别检测HCT116细胞增殖活性和克隆形成能力;实时荧光定量PCR法检测HCT116细胞中CDK2、CDK3、CDK4、CDK6的mRNA水平;Westernblot法检测细胞中蛋白总AKT、ERK1/2以及磷酸化AKT(p-AKT)、ERK1/2(p-ERK1/2)的表达水平。结果与p-Cont对照组相比,p-NDUFA4组中NDUFA4的表达水平显著升高(均P<0.01);细胞增殖和克隆形成能力明显增强(均P<0.05);CDK2、CDK3等的mRNA水平显著上调(均P<0.05);p-NDUFA4组中p-AKT和p-ERK1/2蛋白的表达水平明显上调(均P<0.05)。结论过表达NDUFA4能明显促进人结直肠癌细胞的体外生长,其机制可能与AKT和ERK信号通路的变化相关。
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