人脐带间充质干细胞对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响及可能机制

作者：卢晓莉; 刘广芝; 成乐楠; 赵子仪; 葛利葱; 杨秋云^*

来源：中华实用诊断与治疗杂志, 2020, 34(04): 334-338.

DOI：10.13507/j.issn.1674-3474.2020.04.003

• 卵巢癌SKOV3细胞
• 人脐带间充质干细胞
• PI3K/Akt信号通路
• 细胞凋亡

目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells, hUC-MSCs)对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响及可能作用机制。方法取传代培养至第5代的hUC-MSCs细胞,应用显微镜下观察细胞形态,采用流式细胞术检测细胞表面标志物。取细胞数分别为0个/mL(对照组)、1×106个/mL(低剂量组)、2×106个/mL(中剂量组)、4×106个/mL(高剂量组)第5代hUC-MSCs细胞悬液0.5 mL,接种于Transwell小室膜上,应用Transwell小室与对数生长期SKOV3细胞共培养60 h,采用CCK-8法检测SKOV3细胞增殖相对抑制率,采用流式细胞术检测SKOV3细胞凋亡率,采用实时荧光定量PCR法检测SKOV3细胞PI3K mRNA、Akt mRNA、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2) mRNA、caspase-3 mRNA相对表达量。结果显微镜下第5代hUC-MSCs呈贴壁长梭状细胞,单核,大小较均一,呈漩涡状、放射状或平行排列,仍可保持原代hUC-MSCs细胞典型形态;流式细胞仪检测结果显示,第5代hUC-MSCs细胞表面CD44、CD29表达率分别为(98.406 7±0.133 2)%、(98.393 3±0.366 9)%,CD34、CD45表达率分别为(0.013 3±0.005 8)%、(0.006 7±0.005 8)%。第5代hUC-MSCs细胞与SKOV3细胞共培养60 h,低剂量组、中剂量组、高剂量组SKOV3细胞凋亡率[(40.63±0.74)%、(45.53±0.67)%、(56.53±0.57)%]、细胞增殖相对抑制率[(23.96±1.55)%、(40.35±1.34)%、(46.25±2.41)%]和caspase-3 mRNA相对表达量(1.46±0.02、1.91±0.04、2.37±0.01)依次增高(P均<0.05),且均高于对照组[(31.60±0.53)%、0、1](P<0.05)。低剂量组、中剂量组、高剂量组PI3K mRNA(0.60±0.02、0.46±0.02、0.34±0.04)、Akt mRNA(0.85±0.04、0.66±0.03、0.46±0.05)、Bcl-2 mRNA(0.85±0.04、0.69±0.04、0.39±0.03)相对表达量依次降低(P均<0.05),且均低于对照组(1、1、1)(P<0.05)。结论 hUC-MSCs细胞与SKOV3细胞共培养可促进SKOV3细胞凋亡,且hUC-MSCs细胞数越多促凋亡作用越强,其机制可能与下调Bcl-2、上调caspase-3表达,抑制PI3K/Akt信号通路有关。

• 单位
  郑州大学; 河南省人民医院; 吉林大学; 河南大学