摘要

植物GATA基因广泛调控生长发育、环境胁迫和次生代谢等生理功能,但是其作用机制尚不清晰。本研究克隆了二穗短柄草(Brachypodium distachyon) GATA转录因子BdGATA2基因,并进行亚细胞定位和表达分析,为深入研究GATA基因的功能机制提供理论参考。通过无缝克隆试剂盒从二穗短柄草cDNA中克隆BdGATA2基因;使用农杆菌介导烟草瞬时表达系统进行BdGATA2蛋白的亚细胞定位;利用酵母系统验证BdGATA2的转录激活作用;使用RT-qPCR检测在高温和低温胁迫下二穗短柄草体内的BdGATA2基因转录水平变化;利用STRING数据库构建BdGATA2蛋白互作网络。结果表明,BdGATA2与大麦(Hordeum vulgare)GATA基因AC256257.1相似度最高,达到98.32%,表明其具有高度的保守性;BdGATA2蛋白在细胞核中表达,且具有自激活作用;在低温胁迫下,BdGATA2基因表达上调;蛋白互作预测结果显示,BdGATA2蛋白分别与JAZ4 (茉莉酸通路)和PYDK1 (植物生长素合成途径)互作。结果说明,BdGATA2基因具有典型GATA结构域,发挥转录激活功能;在二穗短柄草受到高温和低温胁迫时,BdGATA2基因差异表达;互作网络分析推测BdGATA2蛋白可能参与抗病和生长等多种生理过程。