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摘要
目的研究骨髓间充质干细胞(MSC)对博来霉素(BLM)所致大鼠肺间质纤维化治疗作用的可能机制。方法将54只雌性Wister大鼠按随机数字表法分为对照组、BLM组和MSC组,每组18只。对照组气管内注入生理盐水,BLM组气管内注入博来霉素,MSC组气管内注入博来霉素后,立即经尾静脉注入雄性大鼠MSC液0.5 ml(细胞数为2.5×10~6个),分别于第7、14、28天各组均处死6只大鼠。检测MSC移植前的5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)标记率,留取肺组织行病理学检查,测定羟脯氨酸含量,采用双重免疫荧光法检测BrdU标记的MSC是否表达Ⅱ型肺泡细胞(ATⅡ)特异性标志物肺表面活性蛋白-C(SP-C);RT-PCR法检测不同时期肺组织和骨髓中SP-C mRNA表达量,观察肺损伤后自身骨髓动员是否参与Ⅱ型肺泡细胞的修复。结果 BrdU标记的MSC于48 h终浓度为10μmol/L时标记率>98%,且传代细胞可连续标记。MSC组7、14、28 d的肺组织冰冻切片中均可见到BrdU标记的MSC定位于肺组织并同时表达SP-C。28 d时MSC组与BLM组肺纤维化程度评分分别为(2.17±0.26)分和(2.83±0.24)分,肺组织羟脯氨酸含量分别为(138±21)mg/g和(184±19)mg/g。肺组织中SP-C mRNA的表达量分别为0.98±0.15和0.59±0.14,且两组在不同时期骨髓中SP-C mRNA表达量均较对照组明显增加。结论骨髓间充质十细胞可定植于肺组织,并转化为Ⅱ型肺泡细胞,可阻止肺纤维化的进展,同时损伤诱导自身骨髓动员增强也参与修复过程。
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