鸭脑微血管内皮细胞培养鉴定及其永生化细胞系的建立

作者:黄国梁; 吴晓妮; 邹荣华; 李倩倩; 葛家振; 宋国栋; 郑福英*; 蔺国珍*
来源:甘肃畜牧兽医, 2023, 53(06): 62-66.
DOI:10.15979/j.cnki.cn62-1064/s.2023.06.005

摘要

本研究旨在获得高纯度鸭脑微血管内皮细胞(Brain microvascular endothelial cells,BMECs),并建立其永生化细胞系,为研究鸭疫里默氏杆菌的致病机制提供重要的试验材料。通过胰蛋白酶消化的方法成功分离出樱桃谷鸭原代BMECs,通过猿猴病毒40 (Simian virus 40, SV40)转染的方法,转染后连续传12代获得樱桃谷鸭BMECs永生化细胞系。对BMECs的细胞核以及内皮细胞的标志性蛋白血管性血友病因子(von Willebrand Factor, vWF)进行免疫荧光染色观察,对原代细胞和永生化细胞系进行鉴定。结果显示,成功从樱桃谷鸭脑组织中分离出BMECs并传代培养,经慢病毒转染后体外传代培养12代以上,细胞仍稳定表达v WF,成功建立了樱桃谷鸭BMECs永生化细胞系。

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