科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）为猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea,PED）的病原体。Nsp10是PEDV编码的一种非结构蛋白，在病毒的复制过程中发挥着重要的作用。为研究在病毒侵染宿主细胞时Nsp10蛋白发挥的作用，通过RT-PCR技术扩增Nsp10基因片段，利用同源重组的方法将Nsp10基因连接到pCMV-Myc载体，成功构建了PEDV Nsp10基因的真核表达载体。酶切鉴定及测序结果证实，PEDV Nsp10基因成功克隆到pCMV-Myc载体中，并将重组质粒命名为pCMV-Myc-Nsp10。将重组质粒pCMV-Myc-Nsp10通过脂质体转染至IPEC-J2细胞中，利用Western Blot和间接免疫荧光技术检测pCMV-Myc-Nsp10的表达以及定位情况。结果显示，pCMV-Myc-Nsp10在IPEC-J2细胞中成功表达，并且均匀分布在细胞质和细胞核中，为后续研究PEDV Nsp10蛋白的生物学功奠定了基础。
- 单位
