miR-150-5p靶向GHSR调控结直肠癌细胞HT-29凋亡的研究

作者：李旭彤; 吴宝音; 曹双军; 李晋; 齐富贵

来源：中国现代普通外科进展, 2020, 23(09): 683-687.

• miR-150-5p
• GHSR结直肠癌细胞HT-29
• 细胞凋亡
• 缺氧

目的:探讨miR-150-5p是否靶向GHSR调控结直肠癌细胞HT-29的凋亡。方法:TargetScan在线分析miR-150-5p与GHSR的相关性;将GHSR的3端非编码区克隆进pMir-Glo miRNA载体,利用双荧光素酶报告系统检测miR-150-5p是否靶向调控GHSR;在缺氧以及过表达或敲低miR-150-5p的情况下,通过Western Blot检测GHSR/AMPK/Sirt1/PGC-1α/UCP2通路蛋白表达量和细胞凋亡标志蛋白的表达量。使用Annexin-V染色检测结直肠癌细胞HT-29的凋亡水平。结果:miR-150-5p靶向GHSR的3’-UTR的66-72的位置。缺氧条件下,敲低miR-150-5p后,GHSR、Sirt1、UCP2、p-AMPK、PGC-1α的表达量和细胞凋亡相关蛋白BCL2的表达量均上升(P<0.05)、BAX、Cleaved caspase3表达量和细胞凋亡水平均下降(P<0.05);缺氧条件下,过表达miR-150-5p后,GHSR、Sirt1、UCP2、p-AMPK、PGC-1α的表达量和细胞凋亡相关蛋白BCL2的表达量均下降(P<0.05)、BAX和Cleaved caspase3表达量上升(P<0.05),细胞凋亡水平上升(P<0.05)。结论:缺氧条件下miR-150-5p通过靶向GHSR的m RNA调控GHSR/AMPK/Sirt1/PGC-1α/UCP2通路来促进结直肠癌细胞HT-29的凋亡。

• 单位
  北京市房山区良乡医院