4-PBA通过抑制内质网应激减轻碘普罗胺诱导的HK-2细胞损伤

作者:董姝君; 高昕乐; 罗婷; 陈燕玲*; 何柳桦; 王静蕾; 夏雨果; 陈应琼
来源:遵义医科大学学报, 2022, 45(03): 282-288.
DOI:10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2022.0056

摘要

目的 探讨内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-Phenylbutyric acid, 4-PBA)对碘普罗胺引起的人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤的保护作用及其可能机制。方法 实验分为对照组、碘普罗胺组、碘普罗胺+不同浓度4-PBA处理组(分别加入1、2.5、5 mmol/L 4-PBA处理细胞)。采用CCK-8法检测各组细胞细胞活力,用DCFH-DA染色显微镜下观察并用流式细胞仪检测各组细胞活性氧(Reactive oxygen species, ROS)水平,DAPI染色和罗丹明123(Rhodamine, Rh123)染色分别检测细胞核形态和线粒体膜电位(ΔΨm),Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3、Bax、Bcl-2表达以及内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78、p-JNK、JNK、p-eIF-2α、eIF-2α、p-IRE1α表达。结果 与对照组相比,碘普罗胺组细胞存活率及ΔΨm明显降低,ROS水平,凋亡细胞数,Bax/Bcl-2、p-JNK/JNK及p-eIF-2α/eIF-2α比值,Cleaved-Caspase-3、CHOP、GRP78、p-IRE1α蛋白表达明显增高,而加入不同浓度的4-PBA处理后,可部分逆转上述效应,提高细胞存活率及ΔΨm,下调细胞ROS水平,减少细胞凋亡数,降低凋亡相关蛋白以及内质网应激相关蛋白的表达水平。结论 4-PBA可通过抑制内质网应激减轻碘普罗胺引起的肾小管上皮细胞损伤。

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