脊髓损伤小鼠通过激活小胶质细胞MyD88通路促进神经元铁死亡

作者：黄乔; 李涛; 赵莉莉; 陈志阳; 高小川; 刘芳芳; 武胜昔^*; 邝芳^*

来源：神经解剖学杂志, 2023, 39(01): 71-78.

DOI：10.16557/j.cnki.1000-7547.2023.01.010

• 脊髓损伤
• 神经元铁死亡
• 小胶质细胞
• 髓系分化初级反应蛋白88
• 细胞共培养
• 小鼠

目的:探索脊髓损伤(SCI)后小胶质细胞(MG)炎性活化对神经元铁死亡的作用及其关键信号通路，为修复脊髓损伤寻找新的治疗靶点。方法:小鼠胸段脊髓夹伤后3 d,通过免疫荧光检测钙接头蛋白(Iba-1)与4-羟基壬烯醛(4HNE)的表达。以脂多糖(LPS)及髓系分化初级反应蛋白88(MyD88)抑制剂ST2825处理小鼠原代小胶质细胞，另以糖氧剥夺(OGD)处理SH-SY5Y细胞，再将两种细胞用Transwell共培养24 h, CCK-8法检测SH-SY5Y细胞活力，碘化丙啶(PI)染色结合流式细胞仪分析SH-SY5Y细胞死亡情况，用Western Blot和细胞免疫荧光染色检测小胶质细胞的炎性活化情况和SH-SY5Y细胞铁死亡分子表达情况。结果:小鼠脊髓夹伤后3 d可见损伤局部神经元铁死亡与激活的小胶质细胞密切相关。与对照组相比，LPS刺激上调小胶质细胞中MyD88、核因子-κB (NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素1β(IL-1β)等分子表达。激活的小胶质细胞与SH-SY5Y细胞共培养，可促进OGD诱导的SH-SY5Y细胞死亡率进一步增加，同时使胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白(xCT)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、血红素加氧酶1(HO-1)、铁蛋白重链(FTH1)等分子的表达进一步降低。而MyD88抑制剂ST2825能抑制小胶质细胞的促炎性激活，明显减轻SH-SY5Y细胞铁死亡发生。结论:SCI局部神经元铁死亡与激活的小胶质细胞密切相关，小胶质细胞促炎性激活可促进神经元的铁死亡。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院; 神经内科; 基础医学院; 中国人民解放军空军军医大学