酶水解柴胡皂苷B1制备稀有前柴胡皂苷A的研究

作者:徐天真; 吴梦茹; 邵佳丽; 常悦; 朱烨婷; 陈季璇; 陈璐阳; 陈登艳; 杨欢; 夏国华*
来源:中成药, 2023, 45(12): 4156-4160.

摘要

目的 通过酶水解柴胡皂苷B1获取中药活性成分前柴胡皂苷A,并构建关键技术。方法 以单因素试验考察水解酶、缓冲液pH值、酶/底物质量比、反应温度和反应时间等影响因素,并通过响应面实验设计对酶水解条件进行优化;此后,利用LC-MS、1H-NMR、13C-NMR确定产物的化学结构。结果 柴胡皂苷B1的最佳水解酶为蜗牛酶,在0.20 mol/L HAc-NaAC缓冲液(pH 4.5)中,当酶与柴胡皂苷B1的质量比为30∶1时,于56℃下反应33 h后,水解率高达99.1%,产物经鉴定为前柴胡皂苷A。结论 本研究构建的酶水解关键技术获取前柴胡皂苷A更便捷,不产生柴胡皂苷元副产物,反应过程中不使用无机酸,清洁环保,可为大量制备前柴胡皂苷A以开展药理药效研究奠定基础。