miR-597在肝细胞性肝癌中表达及其对癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响与机制

作者：宜建英; 张星鑫; 王璐; 高强; 穆红^*

来源：生物医学工程与临床, 2020, 24(06): 764-770.

DOI：10.13339/j.cnki.sglc.20201023.009

• 肝细胞性肝癌
• miR-597
• 细胞增殖
• 细胞迁移
• 细胞侵袭
• FOS样抗原2

目的观察肝细胞性肝癌(HCC)组织及细胞系中mi R-597的表达情况,以及上调mi R-597表达对HCC癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其作用机制。方法选择20例HCC患者,其中男性12例,女性8例;年龄21～69岁,中位年龄46岁;临床分期T1N0M0期10例,T2N0M0期3例,T3N0M0期3例,T4N0M0期4例;14例有乙型肝炎病史,1例有乙型肝炎、丙型肝炎重叠感染史,5例无肝炎病史。取癌组织及对应的癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测其mi R-597 mRNA表达水平。采用RT-qPCR检测不同肝癌细胞系及正常肝上皮细胞中mi R-597mRNA表达水平。将体外传代培养人HCC细胞系Hep3B,分为对照组和mi R-597过表达组,分别转染对照(mi R-NC)及mi R-597模拟物(mi R-597 mimics),用RT-qPCR检测细胞中mi R-597 mRNA表达水平;用MTT实验检测Hep3B细胞的增殖能力;划痕实验和Transwell实验检测Hep3B细胞的迁移和侵袭能力;荧光素酶报告实验确定FOSL2是否是mi R-597的靶基因;通过Western blot实验检测Hep3B细胞FOSL2蛋白的表达水平。采用RT-qPCR检测癌组织及对应的癌旁组织中FOSL2 mRNA表达水平,分析mi R-597与FOSL2表达的相关性。结果 HCC组织中mi R-597 mRNA表达水平明显低于癌旁组织(P <0.01)。HCC细胞系中mi R-597 mRNA表达水平明显低于肝正常上皮细胞(P <0.05)。mi R-597过表达组miR-597 mRNA表达水平显著高于对照组(P <0.05),且细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著低于对照组(P <0.05)。mi R-597直接靶定FOSL2的3′非翻译区(3′-UTR),同时mi R-597过表达组FOSL2蛋白的表达水平相对于对照组明显降低(P <0.05),HCC组织中FOSL2 mRNA表达水平明显高于癌旁组织(P <0.01),且FOSL2与mi R-597的表达呈显著负相关(r=-0.784,P <0.001)。结论 mi R-597在HCC组织中低表达而FOSL2高表达,上调mi R-597的表达能够抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与下调FOSL2蛋白的表达有关。

• 单位
  天津市第一中心医院; 孝义市人民医院