变形链球菌表面蛋白spap A区真核表达质粒的构建及表达

作者：曲云鹏; 刘建国; 杨萍; 杨德琴

来源：上海口腔医学, 2009, 18(01): 61-65.

• 变形链球菌
• 表面蛋白
• pVAX1
• 真核表达

目的:构建变形链球菌表面蛋白A区(spap/A)真核表达质粒pVAX1-spap/A,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法:通过基因重组技术,构建真核表达质粒pVAX1-spap/A。采用脂质体转染法,将其转染至COS-7细胞中,然后经免疫组化SABC法检测其在细胞中的表达。结果:真核表达质粒pVAX1-spap/A经酶切分析,证实携带spap/A片段。pVAX1-spap/A转染的细胞胞质呈褐色,pVAX1空质粒转染的细胞胞质中无着色。结论:成功构建真核表达质粒pVAX1-spap/A,所携带的基因序列正确,能够在真核细胞COS-7中正确表达目的蛋白,为下一步基因防龋疫苗的研究奠定了基础。

• 单位
  遵义医学院附属口腔医院; 深圳市龙岗中心医院; 温州医学院