应用CRISPR/Cas9编辑广东小耳花猪MSTN基因

作者：王敏; 黄翔; 石翾; 刘小凤; 曾检华; 刘小红; 陈瑶生; 何祖勇

来源：广东农业科学, 2017, 44(02): 141-148.

DOI：10.16768/j.issn.1004-874X.2017.02.022

• MSTN
• CIRSPR/Cas9
• 广东小耳花猪
• 基因编辑

MSTN基因是肌肉生长抑制基因,破坏MSTN基因的表达成为提高畜禽肌肉产量的有效途径。通过应用CRISRP/Cas9编辑技术对广东小耳花猪MSTN基因的外显子区域进行编辑,破坏MSTN基因的读码框来抑制其表达,从而提高广东小耳花猪的肌肉产量。共设计了6条靶向MSTN基因3个不同外显子的gRNA,经过T7E1酶切检测和TA克隆分析,发现其中3条gRNA能够发生有效切割,其中切割效率最高的达28.3%,最低为17.0%。gRNA1-1和gRNA3-3突变的广东小耳花猪PEF细胞系,突变效率均在50%以上,其中三号外显子上突变位点的突变率达到61.5%。试验结果为后续进行体细胞核移植,生产MSTN基因编辑的广东小耳花猪奠定了基础。

• 单位
  有害生物控制与资源利用国家重点实验室; 中山大学生命科学学院; 广东壹号食品股份有限公司