传统的光学显微技术受限于瑞利/阿贝准则无法分辨出200 nm以下的结构,而超分辨率荧光显微技术能突破衍射极限对亚细胞结构进行观测。这些超分辨率荧光显微技术大体上可以分为3类:①基于结构光照明的超分辨率成像技术,如受激发射损耗显微技术和饱和结构照明显微术;②基于单分子定位的超分辨率成像技术,如随机光学重构显微术和光激活定位显微术;③基于漂白、闪烁的超分辨率成像技术。本文了上述3类超分辨率荧光显微技术提高成像分辨率的方法及应用,并对其发展趋势进行展望。