屎肠球菌透明质酸酶全长基因的克隆表达和免疫原性

作者：吴利先; 黄文祥; 罗涛; 焦晓阳

来源：中华传染病杂志, 2007, 25(10): 584-588.

• 肠球菌
• 屎
• 透明质酸葡糖胺酶
• 基因表达
• 质粒 Enterococcus faecium
• Hyaluronoglucosaminidase
• Gene expression
• Plasmids

目的构建屎肠球菌透明质酸酶(hyaluronidase,hy1)基因重组表达质粒,在大肠埃希菌中表达获得重组蛋白.探讨Hy1蛋白经口服免疫小鼠后,机体产生的免疫应答。方法PCR扩增hy1基因片段,克隆至pQE-30质粒上,构建重组质粒pQE-hy1,转化E.coli DH5α,经异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白Hy1;Western印迹分析其免疫反应性。融合蛋白经镍离子柱纯化后,Hy1和屎肠球菌全菌蛋白TX0016分别给小鼠灌胃进行免疫,ELISA法检测小鼠血清IgG、IgA、小肠黏液sIgA和粪便sIgA。用TX0016进行腹腔攻击已免疫的小鼠,观察其免疫保护性。结果经...

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 汕头大学医学院