RE-1序列沉默转录因子/Kv1.3通路调控血管平滑肌细胞表型转化促进腹主动脉瘤形成的机制

作者：王预立; 姚永杰; 陈亮; 刘宇婷; 李一男; 杨硕菲; 薛冠华; 张岚^*

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(03): 455-458.

• 腹主动脉瘤
• 平滑肌细胞
• 钾离子通道

目的探讨可变剪接调控RE-1序列沉默转录因子(REST)在血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化及腹主动脉瘤(AAA)发生发展中起到的作用。方法检测人AAA组织和小鼠AAA模型及对照正常动脉中膜VSMC形态和弹性纤维改变;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质免疫印迹法(western blot)检测AAA组织及对照正常动脉组织中REST及其剪接异构体REST4的表达。RT-qPCR和Western blot检测沉默REST对人原代主动脉平滑肌细胞(HASMC)收缩型标志物α-SMA、合成型标志物波形蛋白(VIM)以及钾离子通道Kv1.3蛋白表达水平的影响。细胞增殖检测法(CCK-8)和细胞结晶紫染色实验检测沉默REST后HASMC增殖能力的改变。t检验验证定量数据的统计学差异。结果人和小鼠AAA中膜平滑肌细胞形态由梭型向分支型转化, AAA组REST表达低于对照组、REST4表达高于对照组(REST=0.143±0.086, t=5.672,P<0.05;REST=115.245±8.909, t=21.460,P<0.01)。沉默REST后, α-SMA表达量低于对照组, VIM和Kv1.3表达量高于对照组(α-SMA=0.335±0.030, t=9.711, P<0.01;VIM=10.177±0.728, t=15.170,P<0.01;Kv1.3=13.427±1.103, t=14.690,P<0.01), 同时沉默REST后, VSMC增殖能力高于对照组(A450:2.41±0.27比3.85±0.14, t=6.744, P<0.01;光密度值:29.00±2.46比348.25±27.36, t=16.440, P<0.01)。上述作用可被Kv1.3特异性抑制剂逆转(α-SMA=2.448±0.498, t=4.314, P<0.05;VIM=0.758±0.030, t=4.018, P<0.05)。结论 AAA中膜平滑肌细胞中REST可变剪接上调, 抑制REST功能, 激活Kv1.3表达, 进而诱导VSMC表型转化。

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院