TC2N基因促进黑色素瘤的生长及其机制

作者：娄义霞; 顾晶; 朱磊; 孙胜琪; 刘康乐; 姜晓; 韩飞; 陈建平; 曹佳; 刘晋祎^*

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(10): 1020-1029.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202301120

• TC2N
• 皮肤黑色素瘤
• 细胞增殖
• ERK/MAPK

目的 初步探讨TC2N基因对皮肤黑色素瘤(skin cutaneous melanoma, SKCM)发生的影响及其作用机制。方法 使用人类蛋白质图谱(The Human Protein Atlas, HPA)和肿瘤基因图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)数据库分析TC2N在SKCM中的表达及与临床病理特征的关系。利用人黑色素瘤A375构建TC2N基因的过表达细胞模型，采用CCK-8法检测TC2N在细胞增殖中的作用。利用TC2N基因敲除小鼠构建皮肤黑色素移植瘤模型，观察并测量移植瘤的生长，通过免疫组化测定Ki67在移植瘤组织中的表达，分析肿瘤细胞的增殖。此外，进行基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis, GSEA)探索TC2N表达与ERK/MAPK信号通路的相关性，并利用RT-qPCR和Western blot法检测相关基因CyclinD1、c-Myc、CDK2和CyclinE1在体内外的mRNA及蛋白表达水平。结果 与正常皮肤组织比较，SKCM组织中TC2N的表达水平更高，且TC2N基因的高表达与SKCM患者的临床病理分期和淋巴结转移显著相关(P<0.05)。体外细胞实验发现，过表达TC2N基因后，A375细胞的增殖能力显著增加(P<0.05)。敲除小鼠皮下移植瘤模型结果显示，与TC2N+/+小鼠比较，TC2N-/-小鼠肿瘤质量和体积明显降低(P<0.05),提示TC2N基因敲除后显著抑制SKCM的生长。GSEA富集分析提示TC2N与MAPK信号通路显著相关(P<0.01),且TC2N基因与ERK/MAPK下游基因表达呈正相关(P<0.01)。体内外实验均发现，TC2N表达显著促进ERK与p-ERK表达，且影响ERK相关分子CyclinD1、c-Myc、CDK2和CyclinE1的mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01)。结论 TC2N基因可能通过激活ERK/MAPK信号通路促进皮肤黑色素瘤的生长。

• 单位
  第三军医大学; 重庆医科大学; 公共卫生学院; 宁夏医科大学; 中国人民解放军陆军军医大学