蛹虫草免疫调节蛋白分离纯化、结构表征与免疫调节活性研究

作者：徐大众; 马高兴; 马宁; 杨文建; 裴斐; 苏安祥; 胡秋辉^*

来源：食品安全质量检测学报, 2023, 14(12): 100-108.

DOI：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2023.12.040

• 蛹虫草
• 蛋白质
• 纯化
• 结构表征
• 巨噬细胞
• 免疫调节活性

目的 探究蛹虫草蛋白质的免疫调节活性和一级结构。方法 通过碱溶酸沉法提取蛹虫草蛋白质,采用阴离子交换层析法和葡聚糖凝胶层析法对其进行分离纯化,通过建立小鼠巨噬细胞免疫调节模型对各组分进行活性评价,得到免疫活性最佳的组分,通过基质辅助激光解吸飞行时间质谱法测得其分子量大小,通过蛋白质谱解析出其蛋白质一级结构。以脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)作为阳性对照,通过小鼠巨噬细胞研究其对巨噬细胞RAW264.7增殖活性、吞噬率、一氧化氮(nitrogen monoxide, NO)分泌量及免疫因子白细胞介素-1β (interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-6 (interleukin-6, IL-6)、干扰素-γ (interferon-γ, IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)释放量等的影响。结果 分离纯化出的蛹虫草免疫调节蛋白CMP 2b由196个氨基酸组成,分子量为22.460kDa;CMP2b可显著提高巨噬细胞的增殖能力和吞噬能力,细胞增殖率最高达到了空白对照组的(152.91±5.55)%,吞噬能力提高了23.34%;CMP2b可促进巨噬细胞分泌NO、活性氧(reactive oxygen species, ROS)、IL-1β、IL-6、IFN-γ及TNF-α,其中NO分泌水平达到了空白对照组的2.31倍,ROS分泌水平达到阳性对照组LPS的82.33%, TNF-α、IL-1β、IFN-γ和IL-6分泌量分别为空白对照组的5.51、17.42、4.18和26.75倍,显著增强了巨噬细胞免疫调节能力。结论 作为近年来兴起的一种优质珍稀食用菌,蛹虫草蛋白质在体外研究中显示出较强的免疫增强作用,可为蛹虫草作为免疫调节剂的开发提供新思路。

• 单位
  南京财经大学