敲减TULP3对头颈鳞癌细胞生物学行为的影响

作者：江丰; 何垚; 朱载瓯; 丁旭; 叶金海; 吴煜农; 宋晓萌^*

来源：口腔医学, 2022, 42(06): 494-500.

DOI：10.13591/j.cnki.kqyx.2022.06.003

• TULP3
• 头颈鳞状细胞癌
• 上皮间质转化
• 细胞周期

目的 探讨敲减TULP3对头颈鳞状细胞癌(HNSCC)细胞生物学行为的影响。方法 应用TCGA数据比较头颈鳞癌组织与癌旁组织中TULP3表达水平；体外培养人HNSCC细胞系HN4、HN6、CAL27、HSC3、SCC4及正常口腔上皮角质细胞HOK并应用Western Blot比较TULP3蛋白表达水平，免疫组化分析TULP3在HNSCC组织中表达情况。构建RNA干扰寡核苷酸si-TULP3及si-NC转染HN4、HN6,应用CCK-8实验、平板克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell侵袭实验检测敲减TULP3对HNSCC细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。实时定量逆转录PCR及Western Blot检测细胞周期及上皮间质转化(EMT)相关指标变化。构建HN6-shTULP3及HN6-shNC细胞株接种于裸鼠皮下，分析裸鼠移植瘤体积差异。结果 TCGA数据显示头颈鳞癌组织TULP3表达量显著高于癌旁组织(P<0.000 1);HN4、HN6、CAL27、HSC3细胞中TULP3蛋白表达量均高于HOK细胞，TULP3在HNSCC组织中呈阳性表达。HN4、HN6细胞转染si-TULP3后，增殖、侵袭、迁移能力明显弱于si-NC组。敲减TULP3后，HN4、HN6细胞CDK4、Cyclin D1、Cyclin D3、N-cadherin、ZEB2、Slug蛋白表达水平下降，其中CDK4、Slug基因水平也下降(P<0.001);此外，β-catenin蛋白表达水平上升。敲减TULP3后裸鼠皮下移植瘤体积明显小于对照组(P<0.01)。结论 敲减TULP3可以抑制HNSCC细胞系的增殖、侵袭及迁移能力，可能通过调控细胞周期及抑制EMT进程发挥作用。

• 单位
  南京医科大学; 南京医科大学附属口腔医院