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摘要
为改进慢病毒载体生产过程中规模小、生产量不足以及滴度偏低等问题，采用悬浮培养293FT细胞方式，从培养基选择、细胞接种密度、质粒用量等方面对慢病毒包装条件进行优化，通过电击转染并结合生物反应器扩大生产，用离子交换色谱进行纯化以实现慢病毒大规模生产。结果显示以国产培养基M1进行前期细胞扩增培养，用3.75μg/mL质粒电击转染293FT细胞，转染后以2.0×106/m L的密度接种在优化的2 L生物反应器，用M2培养基培养，最终获得的慢病毒载体滴度达到1.8×1012 TU/mL。表明本团队研究的慢病毒载体大规模生产技术可以实现单批次、高滴度、无菌性慢病毒载体的生产，从而为满足临床试验与临床治疗提供基础和保障。
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