红细胞膜相关蛋白通过IL-6/STAT3/ROR-γt信号通路抑制小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎中Th17细胞分化

作者：何可可; 李远迪; 文廷浩; 朱婕; 高杰; 胡蓉; 韩锋; 苏敏^*

来源：解剖学报, 2023, 54(05): 538-545.

DOI：10.16098/j.issn.0529-1356.2023.05.006

• 红细胞膜相关蛋白
• 实验性自身免疫性脑脊髓炎
• 辅助性T细胞17
• 白细胞介素-6
• 信号转录及转录激活因子3
• 维甲酸受体相关孤核受体γt
• 流式细胞术
• 小鼠

目的 探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型中，外源性和内源性红细胞膜相关蛋白(ERMAP)通过白细胞介素6/信号转录及转录激活因子3(IL-6/STAT3)/维甲酸相关孤核受体γt/(ROR-γt)信号通路对辅助性T细胞17(Th17)细胞分化的影响。方法 流式细胞术验证不同浓度ERMAP-Ig融合蛋白功能；琼脂糖凝胶电泳鉴定ERMAP基因敲除小鼠。流式细胞术检测ERMAP-Ig融合蛋白在体外对Th17细胞分化影响。40只6周龄普通C57BL/6小鼠随机分为2组建立EAE模型：对照(control)-Ig和ERMAP-Ig组，每组20只；记录临床评分；流式细胞术检测EAE小鼠体内Th17细胞分化情况。40只6周龄已鉴定的野生型和ERMAP基因敲除小鼠分为2组建立EAE模型：ERMAP+/+和ERMAP-/-组，每组20只。记录临床评分；脊髓HE和固蓝(LFB)染色并进行组织学半定量评分。流式细胞术检测IL-17A+CD4+ T细胞百分比；Western blotting检测IL-6、白细胞介素17(IL-17)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、ROR-γt蛋白水平表达；Real-time PCR检测IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、STAT3和ROR-γt的mRNA表达；ELISA检测细胞水平IL-17和TNF-α的表达。结果 1.外源性ERMAP-Ig融合蛋白抑制体内外Th17细胞分化且减轻小鼠EAE症状。2.与对照组相比，ERMAP-/-组EAE小鼠炎性浸润和脱髓鞘症状加重，Th17分泌IL-17A增加。3.内源性ERMAP基因敲除后，IL-17、TNF-α、IL-6、STAT3及ROR-γt表达均增加。差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ERMAP可能通过IL-6/STAT3/ROR-γt信号通路调控Th17细胞分化，参与小鼠EAE发生发展。

• 单位
  基础医学院; 贵州医科大学; 中国医学科学院