NRF2信号通路在三氯乙烯致HepG2细胞氧化应激中的作用

作者：钟海; 吴**^*; 唐飞; 黄璐; 邹志辉; 余日安^*

来源：中国职业医学, 2020, 47(06): 660-665.

• 三氯乙烯
• 核因子E2相关因子2
• 信号通路
• 氧化应激
• 过氧化氢酶
• 谷胱甘肽过氧化物酶
• 丙二醛

目的探讨三氯乙烯(TCE)致人肝癌细胞系HepG2细胞氧化应激中核因子E2相关因子2(NRF2)信号通路的作用。方法取对数生长期HepG2细胞随机分为对照组和低、中、高剂量组,分别以终浓度为0、2、4、8 mmol/L的TCE刺激24 h后,收集细胞,采用2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力,酶促法检测过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平,酶联免疫吸附法检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)水平,实时荧光聚合酶链式反应法检测NRF2、血红素加氧酶-1(HO1)、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)和醌氧化还原酶1(NQO1)的mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测NRF2、HO1、GCLC和NQO1蛋白的表达。结果与对照组比较,3个剂量组HepG2细胞CAT活力均下降(P值均<0.05),GSH-Px活力均升高(P值均<0.05);低剂量组HepG2细胞MDA水平下降(P<0.05)。4组HepG2细胞SOD活力和8-OHDG水平分别比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05)。与对照组比较,低、中剂量组HepG2细胞NRF2、GCLC的mRNA和蛋白相对表达水平均下降(P值均<0.05),HO1 mRNA相对表达水平均下降(P值均<0.05)。与对照组比较,低剂量组HepG2细胞HO1蛋白相对表达水平升高(P<0.05),NQO1的mRNA和蛋白相对表达水平均升高(P值均<0.05)。中剂量组HepG2细胞HO1蛋白相对表达水平低于对照组(P<0.05)。与其余3组比较,高剂量组HepG2细胞NRF2和NQO1的mRNA和蛋白相对表达水平均升高(P值均<0.05),HO1 mRNA相对表达水平均升高(P值均<0.05)。结论低、中剂量TCE刺激可导致HepG2细胞发生氧化应激,抗氧化物酶活力降低;高剂量TCE刺激HepG2细胞可激活NRF2信号通路,调控下游抗氧化物酶HO1、GCLC、NQO1的表达上调,缓解TCE所致的氧化损伤。

• 单位
  广东药科大学; 公共卫生学院